根據(jù)實驗需求配制相應的流動相接入儀器的各個通路,并配制泵頭和自動進樣器的清洗溶液(10% IPA)。
打開泵、自動進樣器、柱溫箱和檢測器模塊的電源。
打開電腦,啟動工作站,查看各模塊的連接狀態(tài),斷開檢查器流路,用低流速啟動系統(tǒng),觀察系統(tǒng)壓力,排盡假期前保存的純MeOH溶液,壓力穩(wěn)定,接入檢查器流路。
開排氣閥,單個通路排氣泡,排完后記得旋緊。
設置流動相初始比例開始平衡;若流動相含有緩沖鹽,請先用10%的有機相水溶液進行過渡,再換成儀器方法初始比例的流動相進行平衡。
執(zhí)行自動進樣器清洗命令,并將進樣閥切換至Inject的狀態(tài)進行平衡。
設置方法所需的柱溫箱溫度。
若使用VWD/DAD檢測器,待泵開啟約5min后再打開氘燈或鎢燈,并設置檢測波長等。
若使用FLD檢測器,需設置池溫、激發(fā)波長、發(fā)射波長、采集頻率等。
若使用RI檢測器:先打開沖洗閥(purge=on)沖洗參比池約20min,再關閉沖洗閥(purge=off),并設置池溫和極性。
若使用ELSD-5450檢測器,首先開啟氮氣壓力到3.5bar,確保能持續(xù)供氣,設置到高溫,如80℃,沖洗25min左右。監(jiān)測基線,待系統(tǒng)流路充分平衡后,基線正常穩(wěn)定,可以開始進樣分析。
開機后壓力在一段時間逐漸變化(升高或降低),這往往是流動相在色譜柱內還沒有平衡好、柱箱溫度還沒有恒定。如果儀器沒有問題,只要多平衡一會就會穩(wěn)定。若使用的是梯度程序,由于流動相的比例正處在變化中,壓力也會跟隨變化。
泵無壓力,不過液,通常會出現(xiàn)在長假之后,我們排查一下,如果管路里有大段的空氣,重新Purge之后還是不能正常過液,我們可以使用注射器吸出液體重新連接管路,如單向閥內寶石球粘滯問題,可更換單向閥閥芯或用甲醇超聲后裝回。
液相色譜儀開機后如果壓力瞬間變化>3MPa,通常以下四種情況,可依次排查解決:
是否有氣泡;是否有漏液;單向閥不良;或者泵工作相位不正確,可逐個排除。