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等度洗脫VS梯度洗脫,如何選擇?哈嘍,有液相實驗經(jīng)驗的小伙伴應(yīng)該都清楚,在考察液相色譜分離條件時,最重要的參數(shù)就是洗脫條件。其中洗脫條件又分為等度洗脫和梯度洗脫。下面小編就簡單帶大家來看下這兩種洗脫方式的優(yōu)點和缺點,以及他們的適用范圍。01、等度洗脫是指在樣品組分的分析周期中,流動相的組成比例和流速恒定不變的洗脫方式。優(yōu)點1、對于等度洗脫而言,由于方法運行時,流動相的比例不發(fā)生變化,所以它對儀器的要求不高,只需要一個單元泵就可以運行方法。2、由于等度洗脫條件單一,所以比較容易用來摸索方法設(shè)置,例如改變流動相...
4-10 2023
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我拿什么分析你,大分子樣品!體積排阻色譜法(SEC)又稱凝膠色譜法,通常用于分子量大于2000的樣品的分離。SEC方法zui廣泛的用途是測定聚合物的分子量分布,對某些大分子樣品如蛋白質(zhì)、核酸等,也是種很有效的分離純化手段。SEC方法能簡便快速地分離樣品中分子量相差較大的組分,因而適合于未知樣品的初步探索性分離,無需進行復(fù)雜實驗就能較為全面地了解樣品組成分布的概況。體積排阻色譜原理分子的體積排阻,樣品組分和固定相之間原則上不存在相互作用,色譜柱的固定相是具有不同孔徑的多孔凝膠,在固定相確定的分子量范圍內(nèi),...
4-6 2023
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色譜柱傷不起!關(guān)于液相色譜柱使用的6大注意事項喜愛養(yǎng)花的人都知道,不同的花卉有不同的特性,對光照、水分、溫濕度的需求都不相同。要了解這些,才能使花草處于健康的狀態(tài),時不時為你鮮花綻放。反之,不了解這些,花草就處于不健康狀態(tài),不僅不開花,還會把花養(yǎng)死。那么,液相色譜柱做為比較昂貴的色譜耗材,也具有很多特性,如果不了解這些注意事項,一不留神就會用壞。關(guān)于液相色譜柱的使用注意事項,一般有以下幾點:01過濾流動相和樣品流動相通常由水或緩沖溶液與有機溶劑混合而成。原則上,所有經(jīng)過色譜柱的流動相均應(yīng)過濾,但在實際操作上應(yīng)視具體情況而...
4-4 2023
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抽絲剝繭探案四:液相系統(tǒng)壓力高,還可能是這個原因Hello小伙伴們大家好,液相色譜是我們常用的大型分析儀器之一,原理及操作我們自然是非常的熟悉了,但每次提到液相色譜故障排查的時候有些小伙伴就會頭疼了,那種肉眼可見的堵和漏是比較容易解決的,難的是那種不重現(xiàn)沒有規(guī)律的問題。今天小編就給大家揭秘液相與光化學衍生器聯(lián)用的故障排查實例一則,思路和邏輯很重要,記得做筆記奧。卷宗案情陳述事情是這樣的,客戶做黃曲霉毒素檢測,購買了WelView光化學衍生器后,客戶反饋系統(tǒng)壓力高,超壓停機,另外黃曲霉毒素G1和G2分離度也達不到藥典要求,也...
3-30 2023
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手把手教你看高分辨質(zhì)譜的色譜質(zhì)譜圖分辨率是指質(zhì)譜儀區(qū)分兩個質(zhì)量相近(質(zhì)量差為Δm)的離子的能力。分辨率主要有10%峰谷比和半高峰寬兩種計算方式。10%峰谷計算方式如下圖(圖來源網(wǎng)絡(luò)):半峰高比計算方式如下圖(圖來源網(wǎng)絡(luò)):現(xiàn)在我們邊看圖邊了解一些術(shù)語吧。質(zhì)荷比(masschargeratio):離子的質(zhì)量與它所帶電荷的比值,叫作質(zhì)荷比,簡寫為m/z。比如脂質(zhì)CL72:7|CL18:1_18:2_18:2_18:2,分子式為C81H144O17P2,其帶一個電荷時[M-H]-質(zhì)核比為1449.9818,而帶兩個...
3-30 2023
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分段排查法:液相色譜故障排查bi備技能液相色譜是我們實驗室十分常見且應(yīng)用范圍非常廣泛的儀器之一,提到使用或方法開發(fā)可能各位看官都非常得心應(yīng)手了,但是每當儀器出現(xiàn)問題時,小伙伴們想必是很頭痛的吧。莫怕,今天小編就跟大家分享一個特別實用的故障排查方法——分段排查法。什么是分段排查法?分段排查法是通過分段試驗,逐次縮小故障范圍,直到找到故障點,該方法廣泛應(yīng)用于網(wǎng)絡(luò)、交通、電路等眾多領(lǐng)域,可以快速,便捷的診斷出故障來源,在液相色譜系統(tǒng)問題排查中起著十分重要的作用。接下來就跟老趙頭一起來看看如何進行分段排查法進行液相色譜故...
3-28 2023
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不可不知,反相流動相該如何選擇在HPLC中,流動相是純?nèi)軇┗蛘呋旌先軇┮约皫в泄腆w改性劑的溶劑。色譜工作者可以針對HPLC的不同應(yīng)用在數(shù)百種溶劑中進行選擇。溶劑的選擇要考慮諸多因素,如溶劑的粘度、折射率、腐蝕性、透明度等,還有商業(yè)價格。流動相的溶劑強度或有機溶劑百分比可控制分析物的保留時間。1、什么是流動相流動相是使分析物通過色譜柱的溶劑。分析物存在于適當?shù)娜軇┲校跇悠分苽浜笞⑷肷V柱系統(tǒng)。該溶劑不被視為新基質(zhì),因為它不會干擾分析??梢栽跇悠分苽溥^程中選擇分析物的載體的性質(zhì),以滿足特定要求,例如揮發(fā)性和...
3-22 2023
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帶您了解什么是手性色譜柱手性色譜柱(ChiralHPLCColumns)是由具有光學活性的單體,固定在硅膠或其它聚合物上制成手性固定相(ChiralStationaryPhases)。通過引入手性環(huán)境使對映異構(gòu)體間呈現(xiàn)物理特征的差異,從而達到光學異構(gòu)體拆分的目的。要實現(xiàn)手性識別,手性化合物分子與手性固定相之間至少存在三種相互作用。這種相互作用包括氫鍵、偶級-偶級作用、π-π作用、靜電作用、疏水作用或空間作用。手性分離效果是多種相互作用共同作用的結(jié)果。這些相互作用通過影響包埋復(fù)合物的形成,特殊位點與分...
3-20 2023